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用探针熔解曲线法检测急性髓细胞白血病 c-kit 基因突变

Scanning of c-kit mutations in acute myeloid leukemia using probe melting curve method

摘要目的用改良的杂交探针结合溶解曲线新方法检测急性髓性白血病c-kit基因17号外显子上基因突变。方法利用Primer Premier v5.00、Tm Utility v1.3等软件设计引物探针,两个阶段探针分别针对D816、N820和N822等突变热点。取患者DNA样品5μl进行PCR扩增及熔解曲线分析,PCR扩增产物进行测序分析并与熔解曲线分析方法进行比较。结果阳性质粒灵敏度试验的结果显示, N820 G的灵敏度为10%,其余突变灵敏度均能达到5%。12例CBF-AML标本中,5例检测为阳性,突变率为41.7%,测序结果与测序检测结果相符。结论新方法具有方便快速、灵敏度高、特异性好等特点,可用于CBF-AML患者的个体化诊断和治疗。

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