端粒酶逆转录酶反义寡核苷酸对乳腺癌细胞生物学特性及干细胞富集的影响

Effects of hTERT-ASODN on biochemical characteristics and stem cells enrichment of breast cancer cell

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摘要目的：探讨人端粒酶逆转录酶反义寡核苷酸（hTERT ASODN）对乳腺癌MCF-7细胞系干细胞微球体富集及其生物学特性的影响。方法以人端粒酶逆转录酶（hTERT）基因编码区为靶点合成反义寡核苷酸，脂质体介导转染，以正义序列转染作为对照。实验分设转染组（ASODN组），正义序列转染的对照组（SODN组）及空白对照组。采用无血清悬浮培养法观察转染对MCF-7干细胞微球体富集的影响。Western blot检测各组干性标记物CD44及ALDH1的表达。RT-PCR检测各组ABCG2、MDR1 mRNA的表达。采用单因素方差分析对各组数据进行统计学处理。结果 ASODN组干细胞微球体生长速率及球体体积明显差于两对照组。与空白对照及SODN组比较，Western blot 检测发现CD44与ALDH1在ASODN组细胞表达降低，差异有统计学意义（P＜0.01）。RT-PCR 检测发现，在ASODN组细胞ABCG2及MDR1 mRNA的表达量均显著降低，差异有统计学意义（P＜0.01）。而空白对照组及SODN组两者比较差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 hTERT ASODN在抑制乳腺癌干细胞微球体的富集、降低乳腺癌细胞干性表达及其耐药性方面具有重要作用。