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三阴性乳腺癌原代细胞的培养及其特异性结合肽的筛选

Screening of specific poIypeptide binding to tripIe negative breast cancer primary cells

摘要目的:利用噬菌体肽库筛选技术获得与三阴性乳腺癌原代细胞特异性结合的多肽,为探索三阴性乳腺癌的治疗靶点提供试验支持。方法从三阴性乳腺癌新鲜组织分离、培养原代癌细胞并以其为靶细胞,以hs578bst人正常乳腺细胞为吸附细胞,对噬菌体随机十二肽库进行三轮减性筛选;随机挑取15株富集后的噬菌体单克隆,ELISA及DAB染色鉴定噬菌体克隆的亲和力及特异性,并对阳性噬菌体单克隆测序。结果经过3轮筛选,噬菌体克隆得以明显富集,随机挑取的15株噬菌体单克隆中有11株为阳性,ELISA及DAB鉴定发现,5号噬菌体(phage-5)对靶细胞亲和力及特异性最强,经DNA测序和推导,其多肽序列为PHETLTSFVRRG。结论从噬菌体随机十二肽库中成功筛选出与三阴性乳腺癌原代细胞特异性结合的多肽,该多肽可能作为三阴性乳腺癌靶向治疗药物的载体。

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