腺相关病毒介导心肌肌浆网三磷酸腺苷酶基因治疗心力衰竭犬的安全性分析
Biosafety assessment of recombinant adeno-associated viral vector mediated SERCA2a gene therapy of HF beagles
摘要目的 研究心肌注射重组腺相关病毒(rAAV)2/1介导心肌肌浆网Ca2+-ATP酶(SERCA2a)基因治疗慢性心力衰竭犬的安全性.方法 选取成年比格犬8只,随机分为对照组和SERCA2a基因转导组(转导组),每组4只.分别采用PCR、RT-PCR和Weslern blot法从DNA、RNA和蛋白水平检测rAAV2/1-SERCA2a转导后在犬体内的分布;采用双夹心ELISA法检测转导组犬的血清.结果 除注射rAAV2/1的心肌区域外,未注射rAAV2/1 的心肌区域、主要脏器、骨骼肌和性腺中均未检测到rAAV2/1 SERCA2a.对照组与转导组犬心肌、腰大肌、咀嚼肌和睾丸表现出相同的SERCA2a蛋白表达谱,未在其他组织中检测到.转导组犬血清内未检测到抗rAAV2/1 抗体.结论 rAAV2/1 介导的基因转导是相对安全的,未整合到心脏以外的其他组织,也未在犬体内引发体液免疫.
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