尾加压素Ⅱ诱导巨噬细胞表达单核细胞趋化蛋白1上调及机制研究
Urotensin Ⅱ induces upregulation of monocyte chemoattractant protein-1 expression in macrophages and its mechanism
摘要目的 观察尾加压素Ⅱ(UⅡ)对小鼠巨噬细胞(RAW264.7细胞)表达和分泌单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的影响.方法 RAW264.7细胞用UⅡ10-10、10-9、10-8和10-7 mol/L刺激后,检测MCP-1 mRNA和蛋白的水平;还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶抑制剂二苯基碘(DPI)或抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)预处理细胞后,再加入UⅡ10-7 mol/L刺激,检测MCP-1 mRNA表达和蛋白的分泌;用UⅡ刺激细胞不同时间段后,检测NADPH氧化酶亚基的表达水平;用UⅡ刺激细胞后,流式细胞仪检测细胞活性氧的生成.结果 与不加UⅡ时比较,UⅡ10-7 mol/L刺激12h后,巨噬细胞MCP-1mRNA表达和蛋白分泌分别提高了100.5%和57.0%(P<0.01).UⅡ刺激12 h后,p47phox mRNA表达为不加UⅡ时的1.96倍(P<0.01).UⅡ刺激6h后,巨噬细胞活性氧为不加UⅡ时的1.8倍(P<0.01).与单用UⅡ刺激比较,用DPI或NAC预处理后,MCP-1mRNA表达分别下调21.8%和36.2%(P<0.01),蛋白分泌分别下降22.3%和19.5% (P<0.05).结论 UⅡ可能通过NADPH氧化酶依赖的活性氧介导了小鼠巨噬细胞MCP-1的表达和分泌上调.
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