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皮下免疫热休克蛋白65对小鼠巨噬细胞胆固醇流出率的影响及机制

Effect of subcutaneous immunization with HSP65 on cholesterol efflux from macrophagocytes in mice and its mechanism

摘要目的 观察皮下免疫不同剂量热休克蛋白65(HSP65)对载脂蛋白E缺失小鼠动脉粥样硬化及巨噬细胞TC流出率的影响.方法 选择apoE-/-小鼠24只,随机分为磷酸盐缓冲液(PBS)对照组、5μg HSP65组及25μgHSP65组,每组8只,第3、6周进行皮下免疫.实验第16周末取标本,分离小鼠主动脉测定血管斑块面积;用自动生化仪测定小鼠血脂水平,酶联免疫吸附法分别检测血清HSP65抗体滴度及炎性因子白细胞介素10(IL-10)和干扰素γ水平,液闪计数仪检测巨噬细胞TC流出率;提取肝脏mRNA及膜蛋白,分别检测ATP结合盒转运蛋白A1(ABCA1)和G1 (ABCG1)、B族Ⅰ型清道夫受体(SR-BⅠ)的表达.结果 与PBS对照组比较,5μg HSP65组和25μg HSP65组TC流出率明显降低,HSP65抗体滴度和干扰素γ水平明显升高,主动脉粥样硬化斑块面积明显增加(P<0.05,P<0.01);其中25 μg HSP65组血清HDL-C和IL-10表达较PBS对照组明显降低(P<0.01);5μgHSP65组和25 μg HSP65组ABCA1、ABCG1及SR-BⅠ mRNA表达明显低于PBS对照组(P<0.05).结论 皮下免疫HSP65可抑制小鼠巨噬细胞TC流出,可能是通过下调ABCA1、ABCG1和SR-BⅠ的表达.

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