远隔缺血预适应血清外泌体增加SH-SY5Y细胞糖氧剥夺耐受的生物信息学分析

Bioinformatics analysis of RIPC serum exosomes to increase oxygen-glucose deprivation tolerance in SH-SY5Y cells

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摘要目的研究远隔缺血预适应(RIPC)血清外泌体对SH-SY5Y细胞基因表达的影响,探讨差异表达基因对神经细胞在糖氧剥夺(OGD)耐受中的作用.方法 RIPC前后分离人血清外泌体,取RIPC前外泌体(HuE-C)和RIPC后外泌体(HuE-RIPC).将SH-SY5Y细胞分为空白组(正常培养细胞),对照组(培养液加入HuE-C)和RIPC组(培养液加入HuE-RIPC),采用高通量测序各组细胞基因表达并进行生物信息学分析,将3组细胞置于OGD条件下,检测细胞活力,采用实时定量PCR及Western blot检测与神经低氧/缺血相关的基因表达.结果生物信息学显示,RIPC组热休克蛋白(HSP)基因差异表达增加.MTS检测发现,OGD条件下,RIPC组细胞活力明显高于空白组(0.673±0.056 vs 0.481±0.027,P＜0.01).实时定量PCR和Western blot检测显示,OGD条件下,RIPC组HSP70 mRNA表达和蛋白表达明显高于空白组和对照组(P＜0.05).结论人RIPC血清外泌体可引起众多基因表达变化,其中HSP70表达增加可能是其低氧耐受增加的一个原因.