丁苯酞拮抗依托泊苷诱导的血管内皮细胞衰老
3-n-butylphthalide antagonizes etoposide-induced senescence in vascular endothelial cells
摘要目的 探讨丁苯酞(3-n-butylphthalide,NBP)对依托泊苷诱导人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endo-thelial cells,HUVEC)衰老的影响.方法 将HUVEC分为空白对照组(内皮细胞培养液)、依托泊苷组(500 nmol/L依托泊苷+二甲基亚砜)、依托泊苷+NBP低浓度组(500 nmol/L依托泊苷+5 μmol/L NBP)、依托泊苷+NBP中浓度组(500 nmol/L依托泊苷+10 μmol/L NBP)、依托泊苷+NBP高浓度组(500 nmol/L依托泊苷+20μmol/L NBP)组.通过衰老相关β半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色检测衰老细胞比例变化;实时荧光定量聚合酶链反应检测衰老相关分泌表型,如白细胞介素(IL)-8、IL-1β、CXC趋化因子配体1(CXCL1)mRNA水平变化;蛋白质免疫印迹检测衰老相关蛋白P21表达水平变化;免疫荧光染色检测增殖相关蛋白Ki67阳性细胞比例变化.结果 与空白对照组比较,依托泊苷组P21表达、SA-β-gal染色阳性细胞比例、IL-8、IL-1β、CXCL1的mRNA水平均显著升高[1.00±0.00 vs 0.59±0.09、(29.58±4.51)%vs(11.27±1.18)%、2.49±0.11 vs 1.00±0.03、6.32±0.15 vs 1.00±0.03、2.40±0.24 vs 1.00±0.04,P<0.05],Ki67 阳性细胞比例显著降低[(5.95±1.55)%vs(27.38± 7.00)%,P<0.05];与依托泊苷组比较,依托泊苷+NBP低浓度组的SA-β-gal染色阳性细胞比例、P21蛋白表达水平、IL-1β的mRNA水平均降低(P<0.05),Ki67阳性细胞比例增加(P<0.05).结论 NBP对依托泊苷诱导的血管内皮细胞衰老具有拮抗作用.
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