换一批
换一批摘要目的探讨包膜蛋白突变对HBV包装的影响.方法构建包膜蛋白突变的全长HBV基因组表达载体:前S1突变HBV表达载体pHBV-mS1、S loop突变HBV表达载体pHBV-mS和前S1、S共突变HBV表达载体pHBV-mS1S.分别转染HepG2细胞,以野生型HBV质粒(adwR9)转染HepG2细胞为对照;pHBV-mS1S和pcDNA3分别与adwR9共转染HepG2细胞.ELISA方法检测上清液中和胞内S抗原;荧光定量PCR检测胞内和上清液中病毒量.结果突变体pHBV-mS1、pHBV-mS和pHBV-mS1S与对照组adwR9中S蛋白表达量和分泌量无明显差别;单独转染的突变体胞内病毒量较adwR9高,尤其以pHBV-mS1S明显,而突变体上清中病毒量较对照组adwR9低,尤其以pHBV-mS1S明显;pHBV-mS1S与adwR9共转染组上清液中病毒量较pcDNA3与adwR9共转染组低.结论包膜蛋白突变对S蛋白表达量和分泌量无影响,但影响病毒包装,使病毒分泌量下降.
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