基于PI3K/Akt信号通路探索黄芪甲苷Ⅳ-蝎毒多肽对前列腺癌细胞增殖、迁移及自噬的作用机制

Explore the mechanism of astragaloside iv-pesv on proliferation,migration,and autophagy of prostate cancer cells based on the PI3K/AKT signaling pathway

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摘要目的:探索黄芪甲苷Ⅳ和蝎毒多肽对前列腺癌细胞活性、迁移、凋亡、周期、自噬及对PI3K/AKT信号通路相关蛋白表达的影响.方法:将人前列腺癌细胞系LNCaP、PC-3随机分为空白对照组、黄芪甲苷Ⅳ组、蝎毒多肽组,黄芪甲苷Ⅳ-蝎毒多肽组,雷帕霉素(阳性药物组)组,各组给予对应的药物处理24 h后,取对数生长期的肿瘤细胞进行检测.采用细胞增殖检测试剂盒(CCK-8法)、Transwell试剂盒、凋亡试剂盒、细胞周期检测试剂盒、免疫荧光分析检测各组前列腺癌细胞活性、迁移能力及对细胞凋亡、周期、自噬靶点LC3的影响.Western印迹法用于检测p-PI3K、p-Akt、p-mTOR、Beclin1、LC3、P62的蛋白表达水平.结果:与空白对照组相比,黄芪甲苷Ⅳ-蝎毒多肽组前列腺癌细胞活性降低(P<0.05)、细胞穿模数(迁移能力)减少(P<0.05);前列腺癌细胞早期凋亡率(LR)、晚期凋亡率(UR)及总凋亡率均增高(P<0.05);G1期细胞占比增高(P<0.05)、G2+S期占比降低(P<0.05);LC3免疫荧光表达量显著增加(P<0.05);上调了前列腺癌细胞LNCaP、PC-3中LC3Ⅱ和Beclin1蛋白的表达(P<0.05);下调了P62、p-PI3K、p-AKT和p-mTOR蛋白的表达(P<0.05).且黄芪甲苷Ⅳ-蝎毒多肽在抑制前列腺癌细胞活性及迁移能力、抑制细胞有丝分裂、促进细胞早期凋亡及上调LC3表达水平、抑制PI3K/AKT通路和促进自噬靶点优于单独黄芪甲苷Ⅳ组或蝎毒多肽组(P<0.05).结论:黄芪甲苷IV-蝎毒多肽抑制前列腺癌细胞增殖迁移、抑制细胞有丝分裂、促进细胞早期凋亡及促进自噬的机制可能与抑制PI3K/AKT通路有关.