换一批小鼠睾丸中CDYL相互作用蛋白MYH9的表达及功能初探
Expression and function of CDYL-interacting protein MYH9 in mouse testis
摘要目的:鉴定CDYL在小鼠睾丸组织中的特异性相互作用蛋白,并探究其在生精细胞中的表达模式,进一步阐明CDYL蛋白在小鼠精子发生过程中的作用机制.方法:通过免疫共沉淀结合蛋白质谱检测CDYL相互作用蛋白;通过免疫组织化学、免疫荧光、Western印迹检测CDYL相互作用蛋白MYH9在小鼠睾丸细胞中的表达定位;通过逆转录实时荧光定量聚合酶链式反应、Western印迹、免疫荧光检测Cdyl生精细胞条件性敲除(CdylcKO)对生精细胞及精子中MYH9蛋白表达定位的影响.结果:小鼠睾丸中MYH9蛋白与CDYL存在直接结合;在延长型精子细胞中,MYH9与CDYL共定位于精子领结构,且MYH9蛋白与精子领组分肌动蛋白存在直接结合;在附睾尾精子中,MYH9蛋白信号分布在顶体区及尾部全长;在睾丸组织中,CdylcKO会导致Myh9转录水平下调;在精子细胞中,CdylcKO导致精子领结构异常,MYH9蛋白表达量下降,仍定位于精子领上;在附睾尾精子中,CdylcKO会导致MYH9定位出现不同类型的异常,包括顶体信号减弱,尾部信号部分缺失/增强等.结论:在精子形成阶段,小鼠MYH9蛋白定位于精子领结构,其表达及定位受CDYL蛋白影响,CDYL蛋白、以及CDYL与MYH9的结合对于精子形成过程至关重要.
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