葛根汤通过下调THRB表达逆转COC1/DDP细胞顺铂耐药

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摘要目的研究葛根汤对THRB表达的影响,探究该方逆转人卵巢癌细胞株COC1/DDP顺铂耐药的机制.方法采用血清药理学方法制备含药血清,MTT比色法筛选剂量.不同浓度顺铂联合含药血清处理COC1、COC1/DDP细胞后,计算IC50、耐药指数,将COC1/DDP细胞随机分为对照组、DDP组及葛根汤低、中、高剂量组,对应药物干预48 h后,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测THRB mRNA转录水平,Western blot检测THRB、MRD-1、P-gp蛋白表达.结果适宜剂量为10％低剂量含药血清作用48 h.低剂量葛根汤含药血清联合作用能逆转COC1/DDP细胞肿瘤耐药,降低COC1/DDP细胞对顺铂的耐药指数.在COC1细胞株中,THRB mRNA为低水平转录表达;在耐药COC1/DDP细胞中,THRB mRNA均为高水平转录.葛根汤干预后,COC1/DDP细胞内高水平转录的THRB mRNA转录下调,THRB蛋白表达降低,葛根汤低、中、高剂量组THRB mRNA及蛋白表达与DDP组比较均降低(P<0.05).葛根汤作用于卵巢癌COC1/DDP细胞48 h后,MRD-1、P-gp耐药相关蛋白表达降低,并呈一定的剂量依赖性,葛根汤剂量越高,肿瘤细胞的耐药相关蛋白表达降低程度越明显(P<0.05).结论葛根汤能有效增加人卵巢癌细胞株COC1/DDP对顺铂的敏感性,其机制可能与降低THRB基因转录和蛋白表达有关.