黄芩茎叶葡萄糖醛酸水解酶提取工艺、酶学性质、实际应用研究

Extraction process,enzymatic properties and practical application of glucuronic hydrolase in Scutellaria baicalensis stems and leaves

二维码有效期 120s

摘要目的研究黄芩茎叶葡萄糖醛酸水解酶(sbsl GUS)提取工艺、酶学性质、实际应用.方法在单因素试验基础上,以粒度、加水量、提取时间、提取次数为影响因素,酶活性为评价指标,正交试验优化提取工艺.分析底物(黄芩苷)浓度与酶解速度的关系,计算Vmax、Km,考察pH值、温度、金属离子对酶活性的影响,评价pH稳定性、热稳定性.sbsl GUS酶解黄芩苷以制备黄芩素,考察pH值、温度、反应时间、底物初始浓度、加酶量对转化率的影响.结果最优提取工艺为粒度 40 目,加水量 10 倍,提取时间 15 min,提取次数 3 次.酶解符合酶促反应动力学,Km 为 0.006 3 mol/L,Vmax为 70.42 μmol/h,在 pH 值 6.0、温度 45℃、金属离子 100 mmol/L Cu2+下酶活性最强,sbsl GUS在pH值 4.0～7.0、温度 4～30℃范围内稳定性良好.最优制备工艺为pH值 6.0,温度 45℃,反应时间 12h以上,底物初始浓度 67.2 mmol/L,加酶量1 mL/0.269 mmol黄芩苷,转化率为97.83%.结论 sbsl GUS酶解效率高,条件温和,可为获取黄芩素提供简便的制备方法,并且拓展了黄芩茎叶应用途径.