摘要目的 探究柔肝健脾方对肝郁脾虚证溃疡性结肠炎(UC)小鼠的影响.方法 采用慢性束缚应激+过度疲劳+饮食失节方法诱导C57BL/6J小鼠形成肝郁脾虚证,再予3%DSS诱导建立UC模型,将小鼠随机分为空白组、模型组、柔肝健脾方组(20g/kg)、美沙拉嗪组(200 mg/kg),每组6只,灌胃给予相应药物.观察小鼠体质量、粪便情况、疾病活动指数,HE染色观察小鼠结肠组织病理学比较,ELISA法检测血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平,采用试剂盒检测小鼠结肠组织铁负荷、GSH、MDA水平,RT-qPCR和Western blot法检测小鼠结肠组织GPX4、FTH1、ACSL4 mRNA和蛋白表达.利用TNF-α诱导NCM460结肠细胞炎症,加入柔肝健脾方含药血清和铁死亡诱导剂RSL3处理细胞,CCK-8法检测细胞存活率,ELISA法检测细胞上清液IL-1β、IL-6水平,分析细胞中铁负荷、GSH、MDA水平,以及GPX4、FTH1、ACSL4 mRNA和蛋白表达.结果 与模型组比较,柔肝健脾方组小鼠体质量增加(P<0.01),结肠长度延长(P<0.01),疾病活动指数、组织病理学评分、血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平、结肠组织MDA水平、铁水平、ACSL4 mRNA和蛋白表达降低(P<0.01),GSH水平、GPX4、FTH1 mRNA和蛋白表达升高(P<0.01).在NCM460细胞中,柔肝健脾方可抑制TNF-α诱导的细胞上清IL-1β、IL-6水平及铁死亡水平(P<0.01).结论 柔肝健脾方可有效改善DSS诱导的溃疡性结肠炎小鼠结肠炎症以及TNF-α诱导的结肠细胞炎症,其作用机制与调控细胞铁死亡有关.
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