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基于AMPK/ACC/CPT1A信号通路探讨羟基茜草素对AML-12细胞脂质沉积的影响

摘要目的 探讨羟基茜草素(Pur)对AML-12细胞脂质沉积的影响.方法 通过棕榈酸+油酸(PO,0.5+0.25 mmol/L)或棕榈酸(PA,0.5 mmol/L)诱导AML-12细胞,建立体外细胞脂质沉积模型.将细胞分为对照组、模型组和Pur 20、40、80 μmol/L组.CCK8法测定细胞活力;生化试剂盒检测细胞甘油三酯(TG)水平;尼罗红染色检测细胞脂滴沉积情况;RT-qPCR法检测细胞内相关脂质代谢基因SREBP1c、FASN、CD36、ACACɑ、PPAR-γ、SCD1,炎症基因IL-1β、IL-6、TNF-ɑ、CCL5、CXCL10 及 AMPK/ACC/CPT1A通路相关基因AMPKɑ1、AMPKɑ2、ACC、CPT1A mRNA 表达;Western blot 法检测细胞 p-AMPKɑ、AMPKɑ、p-ACC、ACC、CPT1A 蛋白表达.结果 0~100 μmol/L Pur对AML-12细胞活力无明显抑制作用(P>0.05).与对照组比较,模型组AML-12细胞尼罗红染色半定量和TG水平升高(P<0.01);SREBP1c、FASN、CD36、ACACɑ、PPAR-γ、SCD1、IL-1β、IL-6、TNF-ɑ、CCL5、CXCL10 mRNA 表达升高(P<0.01),AMPKɑ1、AMPKɑ2、ACC、CPT1A mRNA 表达降低(P<0.01);p-AMPK/AMPK、p-ACC/ACC 比值及CPT1A蛋白表达降低(P<0.01).与模型组比较,Pur 40、80 μmol/L组细胞尼罗红染色半定量和TG水平降低(P<0.01);SREBP1c、FASN、CD36、ACACα、PPAR-γ、SCD1、IL-1β、IL-6、TNF-ɑ、CCL5、CXCL10 mRNA 表达降低(P<0.05,P<0.01),AMPKɑ1、AMPKɑ2、ACC、CPT1A mRNA 表达升高(P<0.05,P<0.01);p-AMPK/AMPK、p-ACC/ACC比值及CPT1A蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01).结论 Pur对AML-12细胞脂质沉积有较好的抑制作用,其作用可能与调控AMPK/ACC/CPT1A信号通路相关.

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2025年47卷9期

3096-3101页

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