换一批
换一批表达禽流感病毒NP和M2融合基因重组乳酸菌的构建及鉴定
Construction and Identification of Recombinant Lactobacillus plantarum NC8 Expressing NP Fused with M2 Proteins of Avian Influenza Virus
摘要为了在乳酸菌中表达H9N2亚型禽流感病毒(AIV)NP和M2基因并检测其反应原性,先以pMD19-T-M2质粒作为模板,采用PCR方法克隆M2全长基因,然后将M2基因亚克隆入pSIP409-pgsA′-NP质粒中,构建重组质粒pSIP409-pgsA′-NP-M2,再将重组质粒pSIP409-pgsA′-NP-M2通过电转化的方法转入植物乳杆菌Lb.plantarum NC8中,制备重组菌NC8-pSIP409-pgsA′-NP-M2并诱导表达,最后通过流式细胞术、免疫荧光和免疫印迹技术验证.结果表明,重组菌NC8-pSIP409-pgsA′-NP-M2能够经诱导表达NP-M2融合蛋白,并且与兔源NP单克隆抗体和抗M2的小鼠血清具有反应原性.试验为后续研究禽流感广谱口服疫苗奠定了基础.
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