基于表面等离子共振技术鉴定鸡补体受体2与其配体chC3 d的亲和力
The Identification of Binding Affinity between Chicken Compliment Receptor 2 and Its Ligands chC3 d by Surface Plasmon Resonance
摘要鸡补体受体2(Chicken complement receptor 2,chCR2)是一种表达于鸡B淋巴细胞表面的跨膜蛋白,chCR2可以与其生理学配体鸡补体组分3 d(Chicken complement component 3 d,chC3 d)相互作用.目前评估受体与配体亲和力的方法主要有表面等离子共振技术(Surface plasmon resonance,SPR)和生物膜干涉技术(Biolayer interferometry,BLI)等.旨在利用表面等离子共振技术鉴定chCR2受体分子与其配体chC3 d分子的亲和力.成功构建了重组真核表达载体pTT5-chCR2和pTT5-chC3 d;利用HEK 293F表达系统表达了 His-chCR2和His-chC3 d蛋白;利用NI柱纯化系统纯化了 His-chCR2和His-chC3 d蛋白;利用表面等离子共振技术,通过分析chCR2与chC3 d结合的动力学参数得出两者之间的平衡解离常数KD为1.37 μmol/L.结果表明chCR2与其配体chC3 d之间的亲和力较高.
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