华法林相关维生素K环氧化物还原酶复合体亚单位1及细胞色素P450 2C9基因型快速检测的方法研究

The efficient method for detecting vitamin K epoxide reductase complex subunit 1 and cytochrome P450 2C9 after the treatment of warfarin

二维码有效期 120s

摘要目的建立一种快速、准确、简便、经济的检测维生素K环氧化物还原酶复合体亚单位1(VKORC1)和细胞色素P450 2C9(CYP2C9)基因型的方法.方法提取220例肺栓塞患者外周血的DNA,针对2个基因的SNP位点设计特异性引物,并进行荧光聚合酶链反应(PCR),根据荧光PCR的熔解曲线分析样本的基因型.同时对样本进行传统的限制性酶切片段长度多态性(PCR-RFLP)基因分型,从时间、通量、费用、准确性等方面对2种方法进行比较.结果 VKORC1 1693G＞A和CYP2C9 1075A＞C两个SNP位点的不同基因型具有不同的熔解曲线峰型.220例样本中,VKORC1基因AA型184例,AG型34例,GG型2例,各占83.6％、15.5％、0.9％；CYP2C9基因*1/*1型201例,*1/*3型19例,各占91.4,％、8.6％,无*3/*3型纯合子.PCR-RFLP检测结果与上述结果基本相同.2种方法相比,前者较后者操作步骤少,用时少,费用相当,结果更准确.结论利用荧光PCR检测VKORC1及CYP2C9的SNP分型操作简便、快速、经济、准确,适用于临床实验室开展基因分型.