换一批摘要目的 建立可进行条件性敲除X-盒结合蛋白1(Xbp1)基因的flox杂合子小鼠.方法 通过ET-clone的方法构建基于cre-loxp系统和FLP-frt系统的条件性基因打靶载体.载体线性化后电转JM8A3 ES细胞,经G418和Ganc筛选获得抗性ES细胞克隆.经长片段PCR鉴定获得正确同源重组的阳性克隆.阳性ES细胞经克隆扩增后,注射入C57BL/6J小鼠的囊胚中,获得嵌合鼠,筛选出高比例嵌合小鼠与野生型C57BL/6J小鼠交配后获得阳性F1代小鼠,并分别进行PCR和测序鉴定.结果 成功构建打靶载体,共获得144个抗性ES细胞,克隆经长片段PCR鉴定,共获得4个正确同源重组的阳性克隆.获得4只阳性F1代小鼠,经测序鉴定正确.Xbp1基因flox杂合子小鼠表型无明显异常.结论 成功构建了条件性敲除Xbp1基因的flox杂合子小鼠,为未来研究器官或组织特异性的Xbp1生物学作用奠定了基础.
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关键词
X-盒结合蛋白1非折叠蛋白反应内质网应激条件性基因敲除Cre/loxp系统X-box-binding protein 1 (Xbp1)Unfolded protein responseEndoplasmic reticulum stressConditional gene knockoutCre/loxp system
栏目名称
DOI
10.3877/cma.j.issn.2095-3216.2019.01.004
发布时间
2019-07-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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