摘要目的 研究颅脑创伤(TBI)动物血清预处理诱导型神经干细胞(iNSCs)立体定向移植对TBI后补体活化的影响.方法 采用自由落体脑打击装置制备雄性成年C57BL/6小鼠TBI模型,将48只神经功能缺损评分(NSS)为4～8分的小鼠纳入TBI组,按照随机数字表法选取24只用于制备TBI小鼠血清和热灭活TBI小鼠血清,余下24只按照随机数字表法分为TBI小鼠血清预处理iNSCs(TBI-iNSCs)移植组(6只)、热灭活TBI小鼠血清预处理iNSCs(HITBI-iNSCs)移植组(6只)、磷酸盐缓冲液(PBS)预处理iNSCs(PBS-iNSCs)移植组(6只)和对照(Control)组(6只).同时设置假手术(Sham)组(6只).于TBI后12 h,用脑立体定向仪分别将含1×106个TBI-iNSCs、HITBI-iNSCs、PBS-iNSCs单细胞悬液或等体积PBS移植到TBI小鼠脑内.于TBI后14 d处死动物,取脑组织行Western blot检测补体活化产物(C3d和C9)、 补体调节因子Crry和细胞凋亡标记物active Caspase-3等蛋白表达水平;取脑组织行免疫荧光染色和原位末端标记(TUNEL)染色,观察TBI-iNSCs、HITBI-iNSCs和PBS-iNSCs移植对TBI小鼠脑内NeuN抗体阳性和TUNEL阳性细胞数量的影响.结果 Western blot检测示:相比Sham组,PBS-iNSCs组、HITBI-iNSCs组、TBI-iNSCs组和Control组C3d、C9和active Caspase-3表达水平明显增高;而相比Control组,PBS-iNSCs组、HITBI-iNSCs组和TBI-iNSCs组C3d、C9和active Caspase-3表达水平明显降低;相比PBS-iNSCs组和HITBI-iNSCs组,TBI-iNSCs组C3d、C9和active Caspase-3表达水平明显降低,组间差异具有统计学意义(P<0.05).此外,相比Control组,PBS-iNSCs组、HITBI-iNSCs组、TBI-iNSCs组和Sham组Crry表达水平明显增高;相比Sham组,PBS-iNSCs组、HITBI-iNSCs组和TBI-iNSCs组Crry表达水平明显增高;相比PBS-iNSCs组和HITBI-iNSCs组,TBI-iNSCs组Crry表达水平明显增高,组间差异具有统计学意义(P<0.05).免疫荧光染色和TUNEL染色示:PBS-iNSCs组和HITBI-iNSCs组NeuN抗体阳性和TUNEL阳性的细胞数量差异无统计学意义;然而,与PBS-iNSCs组和HITBI-iNSCs组相比,TBI-iNSCs组NeuN抗体阳性和TUNEL阳性的细胞数量明显减少,组间差异具有统计学意义(P<0.05).结论 TBI小鼠血清预处理iNSCs立体定向移植可上调TBI小鼠脑内Crry水平,抑制补体活化,减轻脑损伤.