Nurr1基因转染人脐血间充质干细胞诱导分化为多巴胺能神经元的实验研究
Differentiation of human umbilical cord blood mesenchymal stem cells transfected by Nurr1 gene into dopaminergic neurons in vitro
摘要目的 探讨外源性Nurr1基因修饰的人脐血间充质干细胞在基因重组成纤维细胞生长因子-8(FGF8)和音猬因子(Shh)诱导下体外分化为多巴胺能神经元的情况.方法 间充质干细胞被随机分为A组(对照组)、B组(Nurr1组)、C组(FGF8+Shh组)及D组(Nurr1+FGF8+Shh),采用脂质体法将pcDNA3.1-Nurr1转染B、D组间充质干细胞,Western blot观察Nurr1基因表达情况,并在神经元条件培养液中进行增殖培养和诱导分化,间接免疫荧光染色法鉴定细胞性质,高效液相色谱法测定多巴胺含量.结果 Western blot结果显示转染后Nurr1蛋白表达明显增高.A组和B组末发现酪氨酸羟化酶(TH)阳性细胞,而C组和D组TH阳性细胞分别为10.12%±2.65%及25.36%±3.13%,多巴胺含量分别为(43.6±2.1)nmol/L及(83.2±3.5)nmol/L,差异均有显著性意(P<0.01).结论 人脐血间充质干细胞在FGF8和Shh诱导下可以分化为多巴胺能神经元,外源性Nurr1基因修饰后,分化为多巴胺能神经元的数量增加.
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