基于多色流式降维聚类方法的自发性细菌性腹膜炎患者T淋巴细胞亚群分析

Dimensionality reduction and clustering method of flow cytometric data for measuring T cell subpopulations in patients with spontaneous bacterial peritonitis

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摘要目的:建立多色流式降维聚类分析方法，检测自发性细菌性腹膜炎（SBP）患者外周血和腹水中T细胞亚群，探讨SBP患者外周以及腹腔局部T淋巴细胞的表面标志物表达差异。方法:选取2021年12月至2022年1月就诊于首都医科大学附属北京地坛医院的4例SBP患者为研究对象。根据多色流式荧光搭配原则，初步确立检测外周血及腹水T淋巴细胞亚群比例的多色流式配色方案。利用健康对照者外周血单个核细胞（PBMCs）调节最适检测电压及荧光补偿；设定条件后，检测4例SBP患者的外周血及腹水样本。建立多色流式降维聚类分析方案以检测SBP患者外周血和腹水中T淋巴细胞的差异。结果:采用统一流形逼近和投影（UMAP）结合FlowSOM插件的多色流式降维分析法将CD4+ T细胞和CD8+ T细胞均分为12个细胞群。该降维聚类方法通过可视化UMAP图定位，并结合统计学分析初步发现，与外周血相比，SBP患者腹水中CD69+PD-1+ CD4+ TEM（t = 3.427、P = 0.0416）以及CD25－TIGIT－CD4+ TEM（t = 3.203、P = 0.0492）比例较高，差异有统计学意义。结论:多色流式降维聚类分析法用于检测SBP患者外周血及腹水样本中T淋巴细胞分群及功能，具有快速、准确、多维度并且可视化强的优点。