换一批
换一批pCMV-N-Flag-Plk1重组质粒的构建及其对骨肉瘤U2OS细胞增殖和凋亡的影响
Construction of recombinant plasmid pCMV-N-Flag-Plk1 and its effect on proliferation and apoptosis of osteosarcoma U2OS cells
摘要Polo样蛋白激酶1(Plk1)是一类丝/苏氨酸蛋白激酶,在骨肉瘤中呈高表达[1].我们通过构建Plk1过表达质粒pCMV-N-Flag-Plkl,检测其对骨肉瘤U2OS细胞增殖和凋亡的影响.一、材料与方法经聚合酶链反应(PCR)、酶切、连接和筛选构建重组质粒,酶切与测序鉴定重组质粒.收集转染48h以后的阴性对照组(未转染任何质粒)、空载体组及重组质粒组U2OS细胞,分别采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot方法检测Plk1mRNA及蛋白表达水平,分别利用噻唑蓝(MTT)法和流式细胞术检测Plk1对骨肉瘤U2OS细胞增殖和凋亡的影响.数据以均数±标准差(-x±s)表示,应用SPSS 13.0统计软件分析,采用单因素方差分析和t检验,以P＜0.05为差异有统计学意义.
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栏目名称
简报
DOI
10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2017.09.057
发布时间
2017-10-30
基金项目
国家自然科学基金
安徽医科大学校基金(2015xkj034)National Natural Science Foundation of China
Foundation of Anhui Medical University
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