甘肃省鼠疫自然疫源地鼠疫耶尔森菌耐链霉素基因rpsL突变位点的检测
Detection of rpsL mutations in streptomycin resistant gene of Yersinia pestis from different natural foci in Gansu Province
摘要目的 分析甘肃省鼠疫疫源地鼠疫耶尔森菌(鼠疫菌)耐链霉素基因rpsL序列突变特征,为突发人间鼠疫病临床用药及鼠疫菌耐药监测提供依据.方法 选取1962-2022年分离自甘肃省不同类型鼠疫疫源地376株鼠疫菌,提取DNA,根据鼠疫菌耐链霉素基因rpsL设计PCR引物和TaqMan-MGB荧光探针,采用PCR产物直接测序法分析rpsL基因的突变位点,实时荧光PCR技术对甘肃省不同疫源地鼠疫菌耐链霉素基因rpsL的128位点碱基突变进行检测.结果 376条rpsL基因序列比对分析发现甘肃省不同类型鼠疫疫源地鼠疫菌rpsL基因全序列均未发生变异,不同年代的鼠疫菌rpsL基因碱基序列均相同,证实甘肃省鼠疫菌rpsL基因序列保守.376株甘肃省不同鼠疫疫源地鼠疫菌羧基荧光素(FAM)探针检测结果均为阳性,对应检测rpsL基因(128:A),△Rn(normalized reporter)>3 000 000;所有鼠疫菌株亚磷酰胺(VIC)探针检测结果均为阴性,对应检测rpsL基因(128:G),△Rn<100 000.结论 建议甘肃省喜马拉雅旱獭疫源地动物鼠疫持续流行的鼠疫监测点实验室进行鼠疫菌耐药性监测,及时发现本地鼠疫菌rpsL基因特征,为突发人间鼠疫诊疗提供依据.
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