换一批
换一批结核杆菌抗原活化的γδT细胞中ZAP-70的酪氨酸磷酸化特点
The dynamics of tyrosine phosphorylation of ZAP-70 in Mycobacterium tuberculosis antigen activated γδT cells
摘要目的观察结核杆菌抗原(Mtb-Ag)活化的γδT细胞信号转导分子ZAP-70酪氨酸磷酸化的特点. 方法用Mtb-Ag和抗CD3单克隆抗体(CD3 McAb)体外刺激人外周血单个核细胞(PBMC),诱导活化,在含IL-2的培养液中扩增培养,分别获得Mtb -Ag激活的T细胞(Mtb AT)和CD3 McAb激活的T细胞(CD3 AT).再分别用Mtb-Ag和CD3 McAb刺激,在不同时间内提取细胞裂解液,用抗-酪氨酸磷酸化蛋白抗体作免疫沉淀,用抗ZAP-70单克隆抗体进行免疫印迹. 结果 Mtb AT中γδT细胞可达60%～80%,CD3 AT中CD3+细胞可达90%以上,而γδT细胞＜10%;Mtb AT细胞用Mtb-Ag再刺激后15*!min时出现ZAP-70的酪氨酸磷酸化,30*!min达高峰,可持续到60～120*!min,而CD3 AT用CD3 McAb再刺激后仅在5*!min时检测到ZAP-70的磷酸化. 结论与CD3 McAb对普通T细胞的作用比较,Mtb-Ag刺激可优先活化γδT细胞,其对γδT细胞ZAP-70活化的特点是:较慢、较强、较持久.
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