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艾蒿花粉主要变应原的分离、纯化与鉴定

Purification and identification of major allergens in Artemisia argyi pollen

摘要目的对我国蒿属花粉中常见、重要的变应原艾蒿花粉进行分离、鉴定与纯化.方法采用不同的提取液得到艾蒿花粉粗浸液,经饱和(NH4)2SO4分级沉淀后用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离蛋白质组分,并用凝胶成像系统测定各组分的相对分子质量(Mr);采用Western blot鉴定其主要及次要变应原;通过DEAE-Cellulose DE-32离子交换层析(ion exchange chromatography,IEC)和Sephadex G-75凝胶层析(gel chromatography)对艾蒿花粉变应原进行纯化.结果分离后得到20多种蛋白质组分,其中Mr为58×103、38×103、25×103、20×103、16×103等5个条带蛋白含量最丰富;分离到的蛋白质组分中有9种蛋白能与确诊的蒿属花粉过敏患者血清中蒿属花粉特异性IgE结合,其中Mr为62×103、43×103、38×103的蛋白条带的结合率最高;经纯化后仅得到Mr为62×103的主要变应原.结论艾蒿花粉的主要变应原Mr分别为62×103、43×103和38×103,层析技术可以对Mr为62×103的主要变应原成分进行纯化.

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作者 杨慧 [1] 刘志刚 [2] 韩庆国 [2] 侯穗波 [3] 梁桂珍 [3] 学术成果认领
作者单位 330006,江西医学院免疫学教研室,变态反应疾病研究室 [1] 518060,深圳大学生命科学院 [2] 深圳市第一人民医院 [3]
分类号 R2
栏目名称 中药免疫
DOI 10.3760/j:issn:0254-5101.2005.01.022
发布时间 2005-03-17
基金项目
国家自然科学基金
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中华微生物学和免疫学杂志

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