摘要目的：探讨mTOR信号通路在iPS定向分化RPE细胞中的调控机制。方法培养iPS细胞，悬浮培养后形成拟胚体EB，诱导分化为RPE细胞。通过免疫细胞化学的方法，观察iPS-RPE细胞分化一个月后特异性蛋白（RPE65、LRAT、zo-1）的表达。同时通过Q-PCR，Western Blotting的方法检测iPS-RPE在不同分化时间点（分化1个月、2个月、3个月）上，iPS-RPE细胞中特异性基因、蛋白的表达变化以及mTOR信号通路的活性。最后应用雷帕霉素抑制iPS-RPE细胞中mTOR的通路，进一步观察iPS-RPE细胞中的蛋白表达变化。Q-PCR采用单因素方差分析（One-Way ANOVA）进行组间比较。结果荧光显微镜观察到iPS-RPE细胞在分化1个月时，表达RPE65、LRAT、zo-1蛋白。与对照组iPS比较，Q-PCR结果显示，实验组RPE65在分化1个月，2个月，3个月时的表达量分别为0.84±0.13，4.8±1.1，20.3±4.9(P=0.000)；Best1分化1个月，2个月，3个月时的表达量分别为1.5±0.16，2.3±0.68，11.78±1.57(P=0.000)；MerTK在分化1个月，2个月，3个月时的表达量分别为4.12±1.94，1.87±0.76，15.53±1.33(P=0.000)，CK18分化1个月，2个月，3个月时的表达量分别为2.4±0.63，2.3±0.37，9.67±1.44(P=0.000)，Western Blotting结果也表明，随着分化时间延长，iPS-RPE细胞中特异性蛋白（BEST1、catenin、MerTK）表达量有显著提高，而mTOR信号通路的活性受到抑制。与对照组（加DMSO）比较，雷帕霉素处理获得的iPS-RPE细胞中BEST1、MerTK、ck18蛋白表达量上升不是很明显，catenin蛋白显著提高。结论建立了体外高等分化、功能高效的iPS-RPE细胞，随iPS-RPE细胞分化时间延长，mTOR信号通路的活性是逐步抑制的。