CISD2抑制舌癌AW13516细胞增殖效果的实验研究

In vitro and in vivo inhibitory effect of CISD2 on proliferation of AW13516 tongue squamous cell carcinoma cells

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摘要目的探讨CISD2对人舌鳞状细胞癌AW13516细胞增殖能力的影响及其相关机制.方法采用CISD2-siRNA慢病毒表达载体及空载体对照质粒感染人舌癌AW13516细胞建立SI组、NC组,并设立未感染对照(CTRL)组.蛋白质印迹法(Western blot)检测CISD2、c-myc、Bax、Bcl-2蛋白表达.采用CCK-8实验检测细胞增殖能力,琼脂集落形成实验检测细胞集落形成能力,流式细胞术检测细胞凋亡率,裸鼠皮下移植瘤模型检测体内增生能力.3组比较采用单因素方差分析.结果 SI组CISD2蛋白的表达量较CTRL组明显降低.SI组24、48、72 h时吸光度(A)值分别为0.258±0.013,0.291±0.022,0.342±0.025,与CTRL组比较差异具有统计学意义(t=13.26,15.84,25.33,P＜0.05).SI组细胞的琼脂集落形成数量为(6.2±0.5)个/孔,明显低于CTRL组的(56.3±2.8)个/孔,差异有统计学意义(t=22.38,P＜ 0.05).SI组细胞的凋亡率为(53.22±3.13)％,高于CTRL组(4.71±0.42)％,差异有统计学意义(t=35.71,P＜0.05).SI组与CTRL组比较,c-myc、Bcl-2蛋白表达水平降低,Bax蛋白表达水平升高,Bcl-2/Bax比率降低.裸鼠皮下移植瘤生长第30天时,SI组的肿瘤体积(231±15)mm3明显小于CTRL组的(859±42)mm3,差异有统计学意义(t=64.77,p＜0.05).结论下调CISD2后可能通过降低c-myc蛋白表达及下调Bcl-2/Bax比值等机制抑制人舌鳞状细胞癌的增殖能力.