摘要目的 观察内皮缩血管肽(Endostatin)反义寡核苷酸转染骨髓基质细胞后在骨髓移植(BMT)小鼠骨髓造血恢复过程中的作用.方法 以脂质体作为转染载体,转染不同剂量的FITC标记的Endostatin反义寡核苷酸,荧光倒置显微镜观察转染效率,用流式细胞术检测最佳转染条件下转染率,用RT-PCR和Western blot方法检测最佳转染条件下Endostatin反义寡核苷酸对BMT后不同时间点小鼠骨髓基质细胞Endostatin mRNA及其蛋白和血管细胞间黏附分子1(VCAM-1)mRNA及其蛋白表达水平的影响.实验分为4组:①正常组:未经任何处理组;②BMT组:空白对照组;③BMT+转染Endostatin反义寡核苷酸组;④BMT+转染Endostatin错义寡核苷酸组.结果 ①在体外成功地将Endostatin反义寡核苷酸导入骨髓基质细胞,转染率达86%;②以Endostatin反义寡核苷酸转染骨髓基质细胞后,BMT后不同时间点骨髓基质细胞Endostatin mRNA及其蛋白表达被显著抑制[Endostatin的灰度值分别为(0.09±0.03)～(1.44±1.19)和(0.02±0.02)～(0.14±0.05)](P＜0.01或P＜0.05),表明转染成功;③Endostatin反义寡核苷酸转染有效促进了BMT后不同时间骨髓基质细胞VCAM-1mRNA及其蛋白表达[VCAM-1的灰度值分别为(1.60±0.92)～(8.05±0.87)和(0.07±0.02)～(0.67±0.09)](P＜0.01或P＜0.05);④Endostatin错义寡核苷酸对BMT后不同时间骨髓基质细胞Endostatin和VCAM-1的表达基本无影响(P＞0.05).结论 Endostatin反义寡核苷酸可降低Endostatin表达,增强VCAM-1的表达,从而促进骨髓微血管生成,改善基质细胞与造血细胞之间和细胞外基质与造血细胞之间的联系而影响骨髓造血.