人眼巩膜成纤维细胞中视黄酸受体的分布及其对巩膜成纤维细胞的生长调控
Expression of retinoid acid receptors in human scleral fibroblasts and regulation of growth of fibroblasts by retinoic acid
摘要目的 研究正常人眼巩膜成纤维细胞视黄酸受体亚型的表达,进一步研究视黄酸对人巩膜成纤维细胞的生长调控作用,从而阐明其和近视发生发展的关系.方法 应用定点解剖及游走促进法分离培养人巩膜成纤维细胞,取3~5代生长良好的细胞,运用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测培养的巩膜成纤维细胞视黄酸受体亚型的表达;在培养液中分别加入0.01、0.10、1.00、10.00和100.00 nmol/L的视黄酸,6 d后进行细胞计数.每株细胞重复3次,共用3株细胞,观察视黄酸对巩膜成纤维细胞的生长调控作用.结果 培养的巩膜成纤维细胞呈双极型或纺锤型,平均分裂时间为2~3 d左右,细胞生长旺盛,近融合时细胞成规则排列的纺锤型.RT-PCR提示体外培养的人巩膜成纤维细胞表达所有的视黄酸受体亚型.视黄酸能明显抑制人巩膜成纤维细胞的生长,对细胞生长的抑制作用呈明显的剂量效应关系,RA浓度≥0.10 nmol/L时,与无RA的对照组相比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 所有的视黄酸受体亚型在人巩膜成纤维细胞上均有分布,视黄酸能明显抑制人巩膜成纤维细胞的生长.
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