EB病毒膜抗原的表达致转基因小鼠发生淋巴瘤的观察
Expression of Epstein-Barr virus membrane antigen induces lymphoma in transgenic mice
摘要目的研究转基因小鼠EB病毒膜抗原(membrane antigen, MA)BLLF1基因的表达与淋巴瘤的关系,探讨EB病毒BLLF1基因作为淋巴瘤致癌基因的可能性。方法(1)观察4只EB病毒膜抗原(MA)BLLF1基因转基因首建鼠(Founder)淋巴瘤的发病时间、发病频率。(2)对发病小鼠进行解剖,观察肿瘤发生部位及特征,取肿瘤组织进行病理学观察。(3)用流式细胞仪分析MA在瘤细胞中的表达并用激光共聚焦显微镜分析MA在瘤细胞中的表达部位。(4)对瘤细胞用碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)染色,用激光共聚焦显微镜观察细胞核形改变。(5)用异硫氰酸荧光素(FITC)标记的抗CD3单抗及抗SIgM多抗染色,分析瘤细胞的免疫表型。结果(1)4只转基因首建鼠中,2只MA表达阳性鼠分别在4月龄和8月龄时发生淋巴瘤,而2只MA表达阴性小鼠同期内未发生淋巴瘤,发病率为2/4。(2)组织病理学检查及瘤细胞免疫表型分析证明为T细胞型淋巴瘤。(3)流式细胞仪分析表明MA在瘤细胞中表达,激光共聚焦显微镜观察证明MA表达部位在细胞浆及细胞膜上。(4)碘化丙啶(PI)染色后,用激光共聚焦显微镜观察细胞核呈分叶状改变,符合癌细胞核形特点。结论 EB病毒膜抗原(MA)BLLF1基因的表达可导致转基因小鼠发生淋巴瘤,提示EB病毒BLLF1基因可能为淋巴瘤的致癌基因。
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