长链非编码RNA RAB11B-AS1通过其正义基因RAB11B抑制骨肉瘤细胞增殖
Long non-coding RNA RAB11B-AS1 prevents osteosarcoma proliferation via its sense gene RAB11B
摘要目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)RAB11B-AS1在骨肉瘤中的表达及其对骨肉瘤细胞增殖的影响及其作用机制.方法 采用2015年10月至2017年10月南方医科大学第三附属医院24对骨肉瘤组织及癌旁正常组织,用实时荧光定量PCR检测组织中RAB11B-AS1的表达水平.用慢病毒载体构建稳定过表达RAB11B-AS1的骨肉瘤细胞,细胞计数试剂盒(CCK-8)和流式细胞技术检测RAB11B-AS1对骨肉瘤细胞增殖、凋亡的影响.建立裸鼠移植瘤模型,观察RAB11B-AS1对裸鼠移植瘤生长的影响.免疫组化和TUNEL实验检测RAB11B-AS1对骨肉瘤细胞体内增殖和凋亡的影响.荧光素酶报告基因探究RAB11B-AS1与RAB11B的关联.两组均数比较采用t检验.结果骨肉瘤组织与癌旁组织的RAB11B-AS1相对表达量分别为0.010±0.015、0.022±0.030,差异有统计学意义(t=2.117,P=0.045).过表达组肿瘤细胞增殖率变化幅度显著低于对照组(F=15.659,P<0.001).流式细胞术显示过表达组细胞处于G0~G1期、S期、G2-M期的比例分别为62.6% ±6.3%、21.4% ±2.2%、16.3% ±1.6%,而对照组则分别为59.4% ±5.9%、25.9% ±2.6%、15.5% ±1.1%,其中两组细胞处于G0~G1期、S期的比例差异有统计学意义(t=17.124、17.321,均P<0.05);过表达组与对照组的肿瘤细胞凋亡率分别为12.7% ±1.3%和10.3% ±1.0%(t=17.321,P=0.003).裸鼠成瘤显示过表达组的肿瘤生长慢于对照组(F=8.798,P=0.009).RAB11B-AS1在骨肉瘤组织的表达与RAB11B表达呈负相关(r=-0.356,P=0.044).结论 lncRNA RAB11B-AS1在骨肉瘤组织中低表达,且其过表达可通过降低 RAB11B 的表达进而抑制骨肉瘤的发生发展.
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