高通量人乳头瘤病毒分型基因诊断方法的研究
Development of a high throughout gene diagnosis assay for genotyping human papillomavirus
摘要目的建立一种可靠、简便经济、快速、高通量的人乳头瘤病毒(HPV)分型检测新方法,并推向临床应用. 方法以各型HPV 通用引物行聚合酶链反应(PCR)扩增127例患者的尖锐湿疣组织和宫颈刮片,将荧光偏振检测技术与模板指导的末端延伸反应(TDI -FP)结合,应用探针杂交延伸反应对临床样本扩增产物进行HPV分型:HPV6,11,16,18,31,33,35,58检测,并以DNA序列测定结果为参照.结果在78例患者的尖锐湿疣组织块中HPV检出率100%,其中两型混合感染14例,占18%,三型混合感染5例,占7%,三型以上混合感染1例.49例患者的宫颈刮片HPV检出率为77%,其中两型混合感染6例,占感染者的17%,三型混合感染3例,占感染者的8%,三型以上混合感染1例.但DNA序列测定方法仅能检出单独一型感染,未检出多重混合感染,两法对单一型检出符合率100%.结论本研究初步建立了通用、特异、便捷,无需标记探针,可自动化高通量用于临床的人乳头瘤病毒分型基因诊断方法.
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