换一批高通量乙型肝炎病毒YMDD突变区焦磷酸测序方法的建立及其可靠性研究
The development and reliability study of high throughput assay for YMDD mutation by pyrosequencing
摘要目的建立基于焦磷酸测序技术的高通量的乙型肝炎病毒YMDD突变临床检测方法.方法应用专用的YMDD突变区域的扩增引物,经PCR扩增及磁珠分离,制备YMDD区焦磷酸测序单链模板,并在PSQ96A焦磷酸测序仪上进行焦磷酸测序,应用标准的YMDD区突变质粒作为阳性对照模板和标准品,观察批量分析的可靠性并初步批量检定90例临床血清标本.结果建立了基于焦磷酸测序技术的YMDD突变检测平台,实现了临床血清标本的高通量检测.能一次获得90人份的YMDD突变临床检测结果.经标准的YMDD突变质粒及血清标本的重复性及可靠性检测,质粒标准品的突变检出率及重复率均达100%,而血清标本达98.8%.结论本方法可准确.高通量、快速检测YMDD区突变,特别适宜临床批量检测需要.
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分类号
R5（内科学）
栏目名称
DOI
10.3760/j:issn:1009-9158.2005.09.025
发布时间
2005-11-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
广东省珠海市科技局科研项目（PC200310056）
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