换一批
换一批炭疽芽孢杆菌特异性基因序列双重TaqMan聚合酶链反应快速检测体系的建立
Development of duplex TaqMan PCR assay for detection of specific gene sequence from Bacillus anthracis
摘要目的 以炭疽芽孢杆菌的主基因和致病毒素基因pagA特异性序列为检测标志,建立高敏感、高特异的荧光双重实时TaqMan聚合酶链反应快速检测体系.方法 根据炭疽杆菌主基因组特异性序列(GS)和特异的毒力岛pagA基因序列(Pag)设计引物及探针,通过构建目的质粒获得标准模板,利用TaqMan标记探针和便携式Smartcycle实时聚合酶链反应检测平台探讨该检测体系的检测敏感性和特异性.结果 该体系炭疽芽孢杆菌的检测敏感度为102拷贝每反应体系,与其他蜡样杆菌群细菌未出现非特异性扩增,具有较高的特异性.整个反应在1 h内完成,适合于实验室或野外环境下炭疽芽孢杆菌的快速检测.结论 本研究建立的双重TaqMan实时聚合酶链反应检测体系可作为炭疽芽孢杆菌快速、准确、特异、敏感的检测手段.
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主题词
聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction)炭疽芽孢杆菌(Bacillus anthracis)敏感性与特异性(Sensitivity and Specificity)基因(Genes)炭疽(Anthrax)
分类号
R4
栏目名称
基础实验诊断研究
DOI
10.3760/j:issn:1009-9158.2006.09.016
发布时间
2006-11-30
基金项目
国家高技术研究发展计划(863计划)
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