换一批
换一批金磁微粒为载体的免疫PCR检测HIV-1 p24
Detection of HIV-1 p24 by Immuno-PCR Assay Using Gold-magnetic Particles as Carriers
摘要目的 建立以金磁微粒为载体的免疫PCR HIV-1 p24检测体系.方法 以金磁微粒作为免疫PCR的载体并通过载体的特异性和非特异性反应验证其可行性;以小鼠抗HIV-1 p24单克隆抗体作为捕获抗体包被金磁微粒,生物素化的羊抗p24多克隆抗体作为检测抗体;报告DNA用生物素标记的引物通过PCR扩增预先制备,并通过链亲和素的桥联标记生物素化的多抗,被两抗体夹心捕获的人重组HIV-1 p24抗原通过PCR扩增报告DNA的方式予以检测;并对检测的灵敏度和线性检测范围进行分析.结果 金磁微粒上偶联抗体的效率可＞95%,偶联抗体的一致性较好,几乎不产生非特异性吸附,分离与洗涤步骤更简便更彻底;免疫PCR检测p24的灵敏度为0.1 ng/L,比ELlSA法检测的灵敏度高1.5×104倍,线性检测范围为p24浓度在0.1～100 ng/L.结论 金磁微粒是较理想的免疫PCR反应载体,金磁微粒为载体的免疫PCR检测HIV-1 p24是一种可兹应用的高灵敏度的检测方法 .
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