新德里金属β-内酰胺酶亚型在碳青霉烯类耐药肠杆菌中分布及分子流行病学研究

Distribution and molecular epidemiology of New Delhi metallo-β-lactamase variants in carbapenem-resistant Enterobacteriaceae

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摘要目的：研究临床分离碳青霉烯类抗菌药物耐药肠杆菌科细菌中新德里金属β‐内酰胺酶（NDM ）及其亚型的分布及流行特点。方法收集医院2014年1月－2015年1月各种临床标本中分离碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌563株，结合改良Hodge试验、EDT A协同及增效试验与PCR扩增检测 blaNDM基因；通过肠杆菌基因间重复一致序列聚合酶链反应（ERIC‐PCR）及多位点序列分型（M LST ）分析菌株之间的同源性，采用药物敏感性试验、接合试验、质粒图谱分析、特异性聚合酶链反应（PC R ）扩增和序列分析等技术研究细菌新德里金属β‐内酰胺酶耐药的分子机制。结果共筛选出45株产NDM菌株，其中肺炎克雷伯菌38株，包括NDM‐1型37株、NDM‐5型1株，大肠埃希菌7株，均为NDM‐7型；所有菌株呈现多药耐药现象，且每株菌均携带多种耐药基因，其中blaCTX‐M 、blaTEM 、blaSHV 、qnrB、qnrS、acc（6′）‐Ib、rmtB、armA等为最常见共同携带耐药基因；MLST 分型显示，产NDM‐1肺炎克雷伯菌主要分布于ST11、ST76、ST495、ST37、ST700及ST395型中，产NDM‐5肺炎克雷伯菌仅为ST14型；21株产NDM菌株接合试验阳性，其中包括13株NDM‐1型、1株NDM‐5型及7株NDM‐7型，部分质粒之间有着相似图谱，blaNDM均定位于约46 kb大小IncX3质粒上。结论医院已出现多种NDM 亚型，主要通过IncX3型质粒在肠杆菌科细菌中传播，存在克隆传播现象；此外，NDM 亚型的出现也表明 NDM 或正处于快速进化过程中而导致其广泛传播。