换一批基于表面增强拉曼散射与侧流免疫层析技术串联的碳青霉烯酶型检测方法的建立及评价
Establishment and evaluation of carbapenemase type detection method based on combination of surface-enhanced Raman scattering and lateral flow immunoassay technology
摘要目的 构建基于表面增强拉曼散射(SERS)与侧流免疫层析技术(LFIA)串联的碳青霉烯酶型(KPC、NDM、OXA-48)检测方法.方法 采用 3种具有拉曼特征峰(1 629 cm-1、1 078 cm-1 和 539 cm-1)的Au@Ag核壳纳米材料作为SERS增强基底,分别偶联KPC、NDM和OXA-48的单克隆抗体制备免疫纳米标签,以LFIA试纸条检测线(T线)处包被的单克隆抗体作为捕获抗体,通过系统优化抗体配对方式及工作浓度,构建双抗体夹心的SERS-LFIA检测体系.应用拉曼光谱仪分析T线处的拉曼特征峰信号,建立数字化结果判读方法.系统评价该检测体系的灵敏度、特异性、重复性及钩状效应,并结合临床样本检测,验证其与聚合酶链式反应(PCR)和商品化胶体金试剂盒检测的符合率,评价诊断效能.结果 建立了基于SERS-LFIA的碳青霉烯酶型检测方法,可特异性识别KPC、NDM和OXA-48主要酶型,目视检测灵敏度均为 5 ng/ml,依托拉曼光谱仪可提升检测灵敏度至 1 ng/ml(KPC和OXA-48);钩状效应临界浓度为 125 ng/ml;低、中、高浓度抗原重复性检测的变异系数(CV)均＜10%.以PCR检测结果为金标准评价该方法的诊断灵敏度和诊断特异性均为 100.00%,与商品化胶体金检测试剂盒检测结果符合率为 100.00%.结论 本研究建立的基于SERS-LFIA的碳青霉烯酶型检测方法灵敏、特异,重复性好,可在临床推广应用,旨在为耐药菌的防控提供基于双重技术支撑的临床检验诊断学依据.
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关键词
碳青霉烯酶分类鉴定表面增强拉曼散射侧流免疫层析法快速检测CarbapenemaseClassification and identificationSurface-enhanced Raman scatteringLateral flow immunoassayRapid detection
栏目名称
DOI
10.11816/cn.ni.2026-251892
发布时间
2026-03-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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