nm23-H1通过下调PKC信号通路抑制肺癌细胞侵袭

nm23-H1 gene inhibits lung cancer cell invasion through down-regulation of PKC signal pathway

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摘要目的探讨nm23-H1基因调控肺癌细胞PKC信号通路抑制肺癌侵袭和转移的分子机制.方法应用Western-blot、Boyden-Chamber、MTT法和激光扫描共聚焦显微镜技术分别检测nm23-H1基因转染前后以及PKC抑制剂Calphostin C处理前后人高转移大细胞肺癌细胞株L9981中胞膜、胞浆PKC的分布变化;体外侵袭力和增殖力的变化;以及细胞中PKC激活转位变化和Ca2+浓度的变化.结果 (1)L9981和L9981-pLXSN细胞中PKCα、PKCβⅡ蛋白在胞膜的表达量明显较L9981-nm23-H1增多(P＜0.001),表明其处于活化状态的PKC明显增加;(2)PKCα、PKCβⅡ在L9981及L9981-pLXSN细胞中主要位于胞核、核周和质膜,明显处于激活转位状态;在L9981-nm23-H1细胞中则主要位于胞浆内,处于无活性状态,前二者胞浆中Ca2+荧光表达强度显著高于后者(P＜0.001);(3)L9981-nm23-H1体外增殖力、侵袭力显著低于L9981和L9981-pLXSN(P＜0.001),但后二者间比较差异无统计学意义(P＞0.05);(4)抑制剂处理后,L9981和L9981-pLXSN细胞中PKCα、PKCβⅡ在胞膜的蛋白表达量和胞浆中的Ca2+荧光表达强度均较处理前明显下降(P＜0.001);3株细胞体外增殖力、侵袭力均较处理前明显下降(P＜0.001).结论 nm23-H1基因可能通过PKC信号通路来发挥其肿瘤转移抑制作用,细胞内钙离子可能参与了这一过程.