换一批
换一批摘要目的:研究大鼠肝微粒体简易制备法对微粒体谷胱甘肽巯基转移酶(mGST)活性的影响.方法:用聚乙二醇6000(PEG 6000)法和钙沉淀法制备大鼠肝微粒体,并与巯基烷化剂N-乙基顺丁烯二酰亚胺(NEM)共孵育,分别测定不同制备法所获mGST活性.结果:PEG 6000法和钙沉淀法制备的肝微粒体,其mGST活性分别为0.15,0.08 μmol*min-1*ml-1;NEM可使其活性分别显著增加至1.797和2.375倍(P<0.001);洗涤纯化后,分别增加至NEM活化前的2.350和4.127倍(P<0.001);其中NEM与微粒体共孵育最适浓度为5～10 mmol/L,最佳激活时间为1～2 min.结论:经PEG 6000法和钙沉淀法高速离心制备的微粒体,分离制备时间短,方法简单易行;钙沉淀法制备的mGST纯度较高.
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