PP60c-Src在血管紧张素Ⅱ对大鼠血管平滑肌细胞信息转导中的作用
Effect of PP60c-Src on angiotensin Ⅱ-induced signal transduction in rat vascular smooth muscl cells
摘要目的:通过观察c-Src在AngⅡ对大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)丝裂原活化的蛋白激酶(MAPK)活性和c-fos蛋白表达的影响,以进一步了解AngⅡ促VSMC增殖的细胞内信息转导机制.方法:原代和传代培养SD大鼠主动脉VSMC,以脂质体包裹反义c-Src寡脱氧核苷酸(Oligodeoxynucleotides ODNs)转染培养的VSMC以抑制c-Src蛋白表达和激酶活性.以未转染的VSMC为对照,观察10-7mol/L AngⅡ刺激对转染的VSMC的MAPK活性和c-fos蛋白表达的影响.蛋白免疫沉淀和酶自身磷酸化率测定c-Src激酶活性;髓鞘碱性蛋白(MBP)底物磷酸化率测定MAPK激酶活性;Western blot免疫印迹法测定c-Src和c-fos蛋白表达情况.结果:转染不同浓度反义c-Src ODNs的VSMC c-Src蛋白含量呈浓度依赖性降低,0.2 μmol/L、0.5 μmol/L、1.0 μmol/L和2.0 μmol/L分别为对照的68.2%、34.7%、30.3%和15.8%,经方差分析具有显著性意义(P<0.01).c-Src激酶活性也显著抑制;以AngⅡ刺激经转染反义c-Src ODNs的VSMC,c-Src激酶活性增幅仅为对照组的8.7%;MAPK活性仅为对照的1.6%;c-fos蛋白表达的增幅为对照组的30.0%.结论:AngⅡ可诱导VSMC c-Src激活和细胞内信息转导,且AngⅡ引起的MAPK和c-fos的激活依赖于c-Src的激活,提示c-Src是AngⅡ促血管平滑细胞增殖的重要信息分子.
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