换一批NMDA受体NR2A亚单位C末端突变体在HEK293细胞的共表达研究
Surface expression of NMDA receptors composed of NR1 subunit and NR2A subunit mutants with partially deleted C-terminus in HEK293 cells
摘要目的:研究N-甲基-D-天冬氨酸 (NMDA) 受体NR2A亚单位的细胞内羧基端在受体装配和表面表达中的作用.方法:构建N末端GFP标记、C末端不同区域缺失的NR2A亚单位表达载体GFP-NR2AΔC1～GFP-NR2AΔC5,其C末端缺失区依次分别为897L-1017S、1024D-1142P、1149D-1347G、1354S-1464V和897L-1464V.将它们单独转染或与NR1亚单位共转染到HEK293细胞,用抗GFP多克隆抗体和Cy3荧光素交联的二抗作活细胞表面受体染色.结果:成功构建了5个C末端不同区域缺失的GFP-NR2A表达质粒GFP-NR2AΔC1～GFP-NR2AΔC5.将这些载体分别单独转染HEK293细胞,均不能获得达细胞膜表面表达.而将这些质粒分别与NR1-1a共转染HEK293细胞,发现它们均能与NR1-1a表达于细胞膜表面.结论:NR1-1a与NR2A的共表达是形成NR1-1a/NR2A亚型NMDA受体并获得细胞表面表达的必要条件.NR2A C末端897L下游并未找到直接与NR1-1a C1盒中内质网滞留基序相互作用的某一特定区域,也不含有决定NR2A亚单位本身细胞内滞留的区域.
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分类号
Q189（神经科学）
栏目名称
DOI
10.3785/j.issn.1008-9292.2003.06.004
发布时间
2004-01-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家重点基础研究发展计划（973计划）（G1999054003）
国家自然科学基金（39970844）
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