换一批丝瓜籽核糖体失活蛋白luffin-a基因的克隆和表达
Cloning and expression of luffin-a gene from the seeds of Luffa cylindrical
摘要目的:从丝瓜籽中克隆HIV整合酶抑制剂luffin-a基因,并构建其表达载体.方法:根据报道的cDNA序列,用RT-PCR的方法从未成熟的丝瓜籽中克隆luffin-a基因,T-A克隆后鉴定核苷酸序列.构建表达载体pET-44a(+)-luffin-a,转化大肠杆菌BL21(DE3),并经IPTG诱导表达.用透析法对包含体复性;SDS-PAGE鉴定luffin-a表达产物,用MTT法分析其生物学活性.结果:克隆的luffin-a基因与国外报道的核苷酸序列同源性为99.73%,其所编码的氨基酸序列完全一致.经SDS-PAGE分析:luffin-a主要存在于包含体中.MTT法测定:复性后蛋白具有与蓖麻毒素A链相似的细胞毒性.结论:本研究成功地构建了luffin-a的表达系统,所表达蛋白经复性后具有生物学活性.
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分类号
R996.2（毒物学《毒理学》）
栏目名称
DOI
10.3785/j.issn.1008-9292.2005.03.003
发布时间
2005-07-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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