换一批
换一批金黄色葡萄球菌肠毒素Ⅰ单克隆抗体的制备和鉴定
Preparation and identification of monoclonal antibodies to staphylococcal enterotoxin Ⅰ
摘要目的:制备稳定分泌抗金黄色葡萄球菌肠毒素Ⅰ(SEI)单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并对单克隆抗体的性质进行鉴定.方法:以SEI蛋白免疫Balb/c小鼠,利用细胞融合技术,经ELISA检测筛选及3次有限稀释,获得目的杂交瘤细胞株;采用杂交瘤细胞免疫小鼠,制备并纯化了单克隆抗体,并对所获得的单克隆抗体进行性质鉴定.结果:最终获得了两株稳定分泌抗体的杂交瘤细胞8F7与D8,两者分别为IgG2b型与IgG1型;亲和常数分别为9.215×108 L·mol-1和1.968×1010 L·mol-1;两者均有较强的特异性,与纯化的SEG、SEE、SEC及金黄色葡萄球菌上清液均未有交叉反应;相加实验表明两个单克隆抗体识别的为相同表位.结论:单克隆抗体的成功制备,为初步建立肠毒素SEI的双抗夹心测定方法奠定了基础.
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主题词
抗体, 单克隆(Antibodies, Monoclonal)变态反应和免疫学(Allergy and Immunology)杂交瘤(Hybridomas)金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)肠(Intestines)
分类号
R155
栏目名称
专题报道
DOI
10.3785/j.issn.1008-9292.2009.03.08
发布时间
2009-06-26
基金项目
浙江省科技厅重大科技攻关项目
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