靶向 RAD18的小干扰 RNA 对人食管鳞癌ECA-109细胞增殖和化疗敏感性的影响

Effect of RAD18-siRNA on proliferation and chemotherapy sensitivity of human esophageal squamous cell carcinoma ;ECA-109 cells

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摘要目的：研究靶向RAD18基因的小干扰RNA （ siRNA ）对食管鳞癌细胞ECA-109增殖和化疗敏感性的影响。方法：合成针对 RAD18基因的 siRNA （ RAD18-siRNA），通过脂质体将其转染人食管鳞癌ECA-109细胞株，采用荧光定量PCR方法检测ECA-109 RAD18和CyclinD1 mRNA的表达，蛋白质印迹法检测其RAD18和CyclinD1蛋白的表达；应用CCK-8法检测ECA-109细胞的增殖和化疗药物对ECA-109细胞存活率的影响，流式细胞术检测ECA-109细胞周期；采用Pearson检验分析RAD18与CyclinD1基因表达的相关性。结果：与未转染组比较， RAD18-siRNA组RAD18表达明显降低（P＜0．05）。 RAD18-siRNA组细胞增殖抑制（P＜0．05），G1期细胞数增多，G2／M期细胞数减少（P＜0．05）。不同浓度顺铂或5-氟尿嘧啶处理细胞后，两组细胞的存活率均下降（均P＜0．05），但RAD18-siRNA组细胞半数抑制浓度较未转染组减少（ P＜0．05）。在食管鳞癌组织中， RAD18基因mRNA的表达与CyclinD1基因mRNA的表达呈正相关（ r＝0．478，P＜0．01）。结论：下调RAD18表达能够抑制食管鳞癌细胞的增殖，提高其对化疗药物的敏感性；CyclinD1在食管鳞癌中的表达水平可能参与这一过程。

作者娄鹏荣 ^[1] 孙晓南 ^[2] 周俊东 ^[3] 邹士涛 ^[4] 学术成果认领

作者单位浙江大学医学院附属邵逸夫医院放疗科，浙江杭州310020; 浙江省宁波市第一医院肿瘤放疗科，浙江宁波315010 ^[1] 浙江大学医学院附属邵逸夫医院放疗科,浙江杭州,310020 ^[2] 南京医科大学附属苏州医院放疗科,江苏苏州,215001 ^[3] 南京医科大学附属苏州医院苏州肿瘤中心重点实验室,江苏苏州,215001 ^[4]

关键词食管肿瘤/药物疗法癌,鳞状细胞/药物疗法 RNA,小分子干扰/治疗应用基因,肿瘤抑制/治疗应用细胞增殖/药物作用细胞周期蛋白D1/药物作用细胞系,肿瘤 Esophageal neoplasms/drug therapy Carcinoma,squamous cell/drug therapy RNA,small interfering/therapeutic use Genes,tumor suppressor/therapeutic use Cell proliferation/drug effects CyclinD1/drug effects Cell line,tumor

主题词癌(Carcinoma)细胞(Cells)药用制剂(Pharmaceutical Preparations)细胞增殖(Cell Proliferation)食管(Esophagus)

分类号 R73-3 R735.1

DOI 10.3785/j.issn.1008-9292.2016.07.06

发布时间 2016-12-02

基金项目

国家自然科学基金