换一批厚壳贻贝乙醇脱氢酶激活肽的纯化、鉴定及其与ADH的相互作用
Purification,Identification of Ethanol Dehydrogenase Activating Peptides from Mytilus coruscus and the Interaction with ADH
摘要[目的]开发厚壳贻贝(Mytilus coruscus)乙醇脱氢酶(Alcohol dehydrogenase,ADH)激活肽,并探究其与ADH作用的分子机制.[方法]以体外ADH激活率为指标,通过凝胶柱层析色谱、反向液相色谱法(RP-LC)分离纯化分子质量小于1 ku的厚壳贻贝活性肽(Mytilus coruscus peptides,MCP),利用液相色谱串联质谱技术(LC-MS/MS)对高ADH激活性的肽组分进行鉴定,并通过分子对接技术探究其与ADH间的相互作用.[结果]MCP经色谱分离得到活性组分Y-I-I,鉴定并筛选出其中3条与ADH对接结合能较低的活性肽序列PPLYE、PPLYQ和APPLYQ,其中活性肽PPLYE体外ADH激活作用最佳,在PPLYE质量浓度为2.0 mg/mL时,ADH激活率达到77.35%,且呈剂量依赖性.分子对接结果显示,PPLYE可结合至ADH活性中心附近的疏水空腔内,通过疏水作用和氢键与受体蛋白ADH形成稳定复合物,其结合能最低,为-35.58 kJ/mol.[结论]PPLYE作为最佳的ADH激活肽,可通过疏水作用和氢键与ADH相互作用形成稳定的复合物来提高ADH活性,本研究为厚壳贻贝资源的开发利用及ADH激活肽的开发提供依据.
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关键词
乙醇脱氢酶厚壳贻贝活性肽分离纯化分子对接alcohol dehydrogenaseMytilus coruscus peptidesseparation and purificationmolecular docking
分类号
R282.77（中药学）
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1673-9159.2024.04.002
发布时间
2024-07-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
浙江省属高校基本科研业务费（2021JZ011）
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