Cyclin D1在黄芪甲苷诱导BMSCs向神经元样细胞分化中的表达
Cyclin D1 Expression During Astragaloside A Induced Neuron-Like Cell Differentiation of BMSCs
摘要目的:研究黄芪甲苷诱导骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)分化的特点和诱导过程中Cyclin D1 的表达特点.方法:采用 100 mg·L-1 黄芪甲苷诱导BMSCs分化,在 1、12、24 h倒置显微镜观察细胞形态变化,免疫细胞化学方法观察巢蛋白(Nestin)、神经元特异性烯醇化酶(neuron specific enolase,NSE)、Cyclin D1 的表达,RT-PCR检测Cyclin D1 mRNA的表达.结果:收集获得的骨髓细胞采用原代和传代培养,至第 3 代BMSCs细胞基本纯化.经 100 mg·L-1 黄芪甲苷作用后,部分细胞自胞体长出突起,形态似神经元样细胞且表达Nestin和NSE抗体,Nestin的表达时相早于NSE且表达强度高于NSE(P<0.05).在药物作用 1 h后,BMSCs细胞Cyclin D1 不论在基因转录水平还是在蛋白表达水平均出现大幅度下调,此时BMSCs开始有Nestin的表达;药物作用 12、24 h,BMSCs细胞Cyclin D1 表达与药物作用前表达水平无显著性差异(P>0.05).结论:黄芪甲苷可能首先通过调整细胞周期,延长了G1 期向S期转变的时间,从而启动了BMSCs的分化程序,诱导BMSCs向神经干细胞分化.在黄芪甲苷的营养作用下,细胞的突起进一步生长并向神经元分化.
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