换一批摘要目的 建立一种基于实时荧光重组酶聚合酶扩增(RT-RPA)技术快速检测人型支原体(MH)的方法,并评估其应用价值.方法 针对人型支原体16S rRNA基因和gap基因设计特异性引物与探针,筛选最优组合.优化RT-RPA反应时间,并评估该方法的特异性与灵敏度.结果 成功建立了MH的RT-RPA检测方法,其最佳反应时间为20 min.该方法特异性良好,仅对人型支原体核酸产生扩增信号,对解脲脲原体(UU)、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌及乳酸杆菌无交叉反应.其最低检测限为2.0 pg,灵敏度显著高于常规PCR法.采用58例临床样本进行验证,结果显示该方法与临床培养法的符合率极高(κ=0.952).结论 本研究建立的实时荧光RT-RAA方法具有快速、灵敏、特异性强等优点,适用于对人型支原体进行大规模筛查和床旁即时检测(POCT).
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关键词
人型支原体实时荧光重组酶聚合酶扩增即时诊断Mycoplasma hominisReal-time fluorescent recombinase polymerase amplificationPoint-of-care testing
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1008-7664.2025.10.041
发布时间
2025-11-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
杭州市医药卫生科技计划项目（B20220609）
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