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夹脊电针对脊髓损伤大鼠程序性坏死相关因子的影响

Effects of Jiaji EA on Programmed Necrosis-Related Factors in Rats with SCI

摘要目的:观察夹脊电针对脊髓损伤大鼠脊髓组织细胞程序性坏死相关因子的影响,明确夹脊电针促进脊髓组织损伤的修复机制.方法:实验采用NYU Impactor M-Ⅲ打击器制作Allen's模型,将36只SD大鼠按照数字表随机分为3组:假手术组、模型组和夹脊电针组,每组12只.再将每组12只大鼠按照治疗时间随机分为3 d组和7 d组,每组6只.7 d组大鼠观察6 h、1 d、3 d和7 d共4个时间点的BBB评分,测评大鼠后肢运动情况.3 d组和7 d组在治疗3 d和7 d后麻醉大鼠抽取血清进行酶联免疫吸附试验,处死大鼠并取出受损节段脊髓组织,进行HE染色和qRT-PCR检测,观察程序性坏死相关因子RIPK1、RIPK3、MLKL和细胞坏死后释放的炎性因子HMGB1及IL-6的表达情况.结果:BBB评分结果显示夹脊电针组在3 d和7 d评分均高于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05);HE染色结果显示夹脊电针组相对模型组比较脊髓坏死性空洞较少,神经元肿胀得到改善,灰质结构较规整,神经元丢失较少,炎性细胞浸润得到改善.qRT-PCR检测结果显示,术后3 d和7 d时间点脊髓组织程序性坏死相关因子RIPK1 mRNA、RIPK3 mRNA及MLKL mRNA的表达明显高于假手术组,差异具有统计学意义(P<0.01).夹脊电针组治疗后与模型组比较,RIPK1 mRNA、RIPK3 mRNA及MLKL mRNA的表达降低,差异具有统计学意义(P<0.05).7 d和3 d模型组比较,RIPK3 mRNA和MLKL mRNA表达量差异均具有统计学意义(P<0.05),7 d和3 d电针组比较RIPK3 mRNA和MLKL mRNA表达量差异均具有统计学意义(P<0.05).酶联免疫吸附试验结果为模型组和假手术组比较HMGB1和IL-6的表达差异具有明显统计学意义(P<0.01).夹脊电针组治疗后,与模型组比较,HMGB1和IL-6的表达量降低,差异具有统计学意义(P<0.05).7 d和3 d模型组比较、7 d和3 d电针组比较,HMGB1和IL-6的表达量差异均具有统计学意义(P<0.05).结论:脊髓损伤后组织细胞坏死并释放炎性因子,在术后3 d时间相关因子大量积累,7 d后表达量回落.而夹脊电针治疗能抑制脊髓组织细胞坏死和炎性因子的释放,进而保护脊髓组织,促进损伤修复.

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