换一批
换一批黄瓜花叶病毒基因沉默载体的效率和稳定性分析
Investigation of efficiency and stability of Cucumber mosaic virus-based gene silencing vector
摘要病毒诱导的基因沉默(virus-induced gene silencing,VIGS)已被广泛应用于植物基因的功能研究.试验以八氢番茄红素脱氢酶(phytoene desaturase,PDS)作为指示基因,在本生烟体内分析黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)作为VIGS载体对植物内源PDS mRNA的沉默效率.采用分子克隆的方法,将Fny-CMV 2b ORF替换为不同长度的PDS序列,并分析了其在本生烟植物上诱导的PDS沉默效率.结果表明,该重组病毒能诱导上部系统叶的光漂白表型,且沉默效率与插入片段长度呈一定的正相关性,但在顶端新生叶中均不引起明显的光漂白现象,过长的片段插入(≥518 nt)影响病毒基因组的遗传稳定性,导致插入片段的部分缺失.CMV作为 VIGS载体,最适合的插入片段约为350 nt.
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关键词
病毒诱导的基因沉默黄瓜花叶病毒2b八氢番茄红素脱氢酶virus-induced gene silencingCucumber mosaic virus2bphytoene desaturase
分类号
Q933
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1004-1524.2017.04.16
发布时间
2017-05-31
基金项目
国家自然科学基金（31470007）
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